GB4789.2-2016菌落总数测定（平板法）

一、菌落数量定义和卫生学意义

•菌落数量定义：指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫克）检样所生长起来的菌落数

•卫生学意义：菌落数量测定是用来判断食品被病毒污染的程度及卫生品质，它体现食品在制造过程中能否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落数目的多少在必定程度上标志着食品卫生品质的好坏。

二、GB4789.2-2016菌落数量测定（平板法）

1.菌落总数检验流程图

2.结果计数

•可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落总数。菌落计数以菌落形成单位(colony-formingunits,CFU)表示。

•选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落数目。低于30CFU的平板记录准确菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。

•其中一个平板有较大块状菌落生长时,则不宜选用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可换算半个平板后除以2,代表一个平板菌落数。

•当平板上发生菌落间无显著界线的环状生长势，则将每条单链成为一个菌落计数。

3.结果计算

•若只有一个稀释度平板上的菌落数在30~300CFU之间,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值减去相应稀释倍数,作为每g(mL)样品中菌落数量结果。

•若所有稀释度的平板上菌落数均高于300CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数除以最高稀释倍数计算。

•若所有稀释度的平板菌落数均大于30CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数除以稀释倍数计算。

•若所有稀释度(比如液态样品原液)平板均无菌落生长,则以高于1除以最低稀释倍数计算。

•若所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU~300CFU之间,其中一个别小于30CFU或高于300CFU时,则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数除以稀释倍数计算。

•若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按式(1)计算:

4.结果报告

•菌落数大于100CFU时,按“四舍五入”原则修约,以整数报告。

•菌落数小于或等于100CFU时,第3位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前2位数字,后面用0代替位数;也只用10的指数方式来表示,按“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。

•若所有平板上为蔓延菌落而难以计数,则报告菌落蔓延。

•若空白对照上有菌落生长,则此次测试结果无效。

•称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以•CFU/mL为单位报告。

•注：菌落数目结果推导与报告方法例子见下面表格

三、质量控制和疑难解析

1.质量控制

•实验室过程中，每批样品稀释液都要做空白对照。

•为了控制环境污染，每次检测过程中，于检验台上打开两块计数琼脂平板，并在检测环境中暴露不超过15分钟，将此平板与本批次样品同时进行培养，以把握检验过程中能否存在来自检验环境的污染。

•定期使用大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄真菌ATCC6538和地衣芽孢杆菌ATCC6633或相应定量活菌参考品，在P2实验室或阳性对照试验室内，用适当的制品样品进行阳性实验验证，并进行记录，次验证试验至少每2个月进行1次。